Prawiratama, Yosa (2024) Produksi Enzim Pengurai Plastik PET (PET Hydrolase) di bawah Kontrol Masing-masing Promotor T7 dan P2069 Mutan pada Defined Medium dan Auto Induction Medium. Undergraduate thesis, Fakultas Sains dan Matematika Undip.

	Text 1. COVER.pdf Download (165kB)
	Text 2. HALAMAN PENGESAHAN.pdf Restricted to Repository staff only Download (438kB) | Request a copy
	Text 4. ABSTRAK.pdf Download (224kB)
	Text 5. ABSTRACT.pdf Download (186kB)
	Text 6. DAFTAR ISI.pdf Download (252kB)
	Text 10. BAB I.pdf Download (204kB)
	Text 15. DAFTAR PUSTAKA.pdf Download (252kB)

Abstract

Salah satu plastik yang sering digunakan yang sukar untuk diurai yaitu PET
(polyethylene therephthalate). PET ini dapat didegradasi oleh enzim PETase (PET
hydrolase). Berbagai rekayasa untuk meningkatkan produksi PETase telah
dilakukan. Salah satu rekayasa yang perlu dicoba yaitu pengembangan produksi
PETase rekombinan dengan menggunakan promotor gen yang tepat di dalam media
yang fisibel secara ekonomi. Promotor P2069 mutan yang berasal dari Bacillus
pumilus merupakan kandidat yang perlu dicoba untuk mengekspresikan PETase,
karena kemampuannya dalam mendorong gen asing mencapai ekspresi tertinggi.
Tujuan penelitian ini antara lain mengkaji fungsi promotor P2069 mutan dalam
mengekspresikan PETase di Escherichia coli. Selain itu dilakukan pula analisa
ekspresi PETase di bawah kontrol promotor T7 di Escherichia coli dalam media
tanpa inducer IPTG (defined medium dan autoinduction medium). Kemudian
dilakukan perbandingan aktivitas PETase dan konsentrasi protein di bawah kontrol
promotor P2069 Mutan dengan promotor T7 di berbagai medium. Gen yang
diekspresikan di bawah kontrol P2069 Mutan yaitu IsPETase, sedangkan yang
diekspresikan di bawah T7 yaitu IsPETase Wild Type (WT) dan ICCG. Penelitian
dilakukan pada media defined medium (LB dan TB) serta autoinduksi (AIM dan
ZYM-5052) di Escherichia coli. Pengamatan dilakukan pada jam ke-0, 4, 8, 12, 16,
20, dan 24 meliputi densitas optikal, konsentrasi protein dengan uji bradford,
visualisasi SDS PAGE, dan aktivitas enzim dengan uji esterase. Hasil penelitian
menunjukkan promotor P2069 Mutan berfungsi dalam mengekspresikan PETase
baik di defined medium maupun autoinduction medium dengan aktivitas tertinggi
terlihat pada media autoinduksi AIM di jam ke-20 sebesar 3,44 U/mL. Aktivitas
PETase dibawah kontrol promotor T7 terlihat paling tinggi pada sampel IsPETase
WT dalam media TB di jam ke-24 yaitu 37,85 U/mL, sementara ICCG terlihat pada
media autoinduksi ZYM-5052 di jam ke-20 yaitu 27,47 U/mL. Aktivitas enzim
PETase terlihat lebih tinggi di bawah kontrol promotor T7 dibandingkan dengan
promotor P2069 Mutan pada seluruh media yang diujikan.
Kata kunci : Ekspresi, Escherichia coli, ICCG, IsPETase Wild Type, PETase

Actions (login required)

View Item