Zulfa, Wardah Kamilia (2025) Kloning, Ekspresi, dan Purifikasi Protein Rekombinan L-Asparaginase dari Isolat Bakteri Arthrobacter psychrolactophilus. Undergraduate thesis, Fakultas Sains dan Matematika Undip.

	Text 1. COVER.pdf Download (67kB)
	Text 2. HALAMAN PENGESAHAN.pdf Restricted to Registered users only Download (207kB) | Request a copy
	Text 4. ABSTRAK.pdf Download (104kB)
	Text 5. ABSTRACT.pdf Download (104kB)
	Text 6. DAFTAR ISI.pdf Download (191kB)
	Text 10. BAB I.pdf Download (124kB)
	Text 15. DAFTAR PUSTAKA.pdf Download (276kB)
	Archive Wardah Kamilia Zulfa.zip Restricted to Registered users only Download (5MB) | Request a copy
	Archive Wardah Kamilia Zulfa.zip Restricted to Repository staff only Download (5MB) | Request a copy

Abstract

L-asparaginase, yang diklasifikasikan pada EC 3.5.1.1, adalah enzim yang
mengkatalisis hidrolisis L-asparagin menjadi L-aspartat dan amonia. Enzim ini
berperan dalam industri pangan karena dapat mengurangi pembentukan
akrilamida, serta dalam industri farmasi untuk sifat antitumornya, khususnya
dalam pengobatan leukemia limfoblastik akut (ALL). Berdasarkan studi
pendahuluan yang dilakukan dengan metode genom mining, didapatkan fakta
bahwasanya gen Asparaginase juga dapat ditemukan pada strain bakteri
Arthrobacter psychrolactophilus. Pada penelitian ini, dilakukan kloning
menggunakan In-Fusion® HD Cloning Kit, dilanjutkan dengan tahapan ekspresi
menggunakan bakteri Escherichia coli BL21 Star (DE3) sebagai host ekspresi dan
pET28a(+) sebagai vektor ekspresi dengan induksi Isopropil-β-Dtiogalaktopiranosid (IPTG) pada suhu inkubasi 18 °C. Selanjutnya, L-Asn
dipurifikasi dengan metode Immobilized Metal Affinity Chromatography (IMAC).
Berdasarkan pengujian menggunakan metode PCR, panjang gen target sesuai
dengan analisis in-silico yaitu 972 bp, tahapan kloning berhasil dilakukan ditandai
dengan fragmen pET28a(+).ApL-Asn yang menunjukkan ukuran 1257 bp. Hasil
ekspresi dan purifikasi dikonfirmasi menggunakan metode SDS-Page dengan
munculnya single band dan diketahui berat molekul monomer enzim ialah 35,72
kDa. Selain itu, jumlah total protein murni yang didapatkan dalam sekali produksi
(500 mL) ialah 336,26 mg untuk sampel crude enzim dan 12,24 mg untuk sampel
hasil purifikasi IMAC.

Actions (login required)

View Item