Hamida, Rahma Altafiani (2024) Ekspresi Gen Putatif Enzim Pendegradasi Plastik Mono (2-Hidroksietil) Tereftalat Hidrolase (MHETase) Di Escherichia coli BL21 (DE3) Dan Karakterisasi Produk Gennya. Undergraduate thesis, Fakultas Sains dan Matematika Undip.

	Text 1. COVER.pdf Download (41kB)
	Text 2. HALAMAN PENGESAHAN.pdf Restricted to Repository staff only Download (164kB) | Request a copy
	Text 4. ABSTRAK.pdf Download (81kB)
	Text 5. ABSTRACT.pdf Download (82kB)
	Text 6. DAFTAR ISI.pdf Download (100kB)
	Text 10. BAB I PENDAHULUAN.pdf Download (113kB)
	Text 15. DAFTAR PUSTAKA.pdf Download (212kB)
	Archive Rahma Altafiani Hamida.zip Restricted to Repository staff only Download (2MB) | Request a copy

Abstract

Penumpukkan limbah plastik, terutama jenis polyethylene terephtalate
(PET), mengakibatkan masalah lingkungan dan mengancam kesehatan makhluk
hidup di sekitarnya. Beberapa metode yang telah dilakukan untuk mengatasi
penumpukan sampah plastik seperti metode mekanik dan kimia membutuhkan
bahan yang mahal dan metode yang rumit. Pendekatan terbaru memanfaatkan
enzim pendegradasi plastik alami yang diproduksi oleh Ideonella sakaiensis untuk
mendegradasi plastik PET. Ideonella sakaiensis memproduksi enzim PET hidrolase
yang mampu mendegradasi PET menjadi bis(2-hidroksietil) tereftalat (BHET),
mono(2-hidroksietil) tereftalat (MHET), dan sejumlah kecil asam tereftalat (TPA)
serta enzim MHET hidrolase (MHETase) yang mendegradasi MHET menjadi TPA
dan etilen glikol (EG). Kemajuan teknologi di bidang molekuler menjadi dasar
untuk pengembangan enzim MHETase, terutama melalui penambangan data
metagenomik yang memungkinkan untuk memperoleh gen putatif enzim
MHETase. Penelitian ini bertujuan untuk mengamati ekspresi gen putatif MHETase
dan mengamati kemampuan enzim MHETase yang diekspresikan oleh gen putatif
MHETase dalam mendegradasi MHET menjadi TPA dan EG. Penelitian in
dilakukan melalui beberapa tahapan yang meliputi transformasi, kloning, dan
verifikasi plasmid pada Escherichia coli (E. coli) DH5α yang dilanjutkan dengan
ekspresi protein target pada E. coli BL21 (DE3) menggunakan penginduksi IPTG.
Protein yang diekspresikan diestraksi hingga diperoleh fraksi whole cell, lisat sel
(terlarut), dan debris sel (tidak terlarut) yang selanjutnya dikarakterisasi dan diamati
kemampuannya dalam mendegradasi MHET. Hasil penelitian menunjukkan bahwa
gen putatif MHEtase berhasil mengekspresikan enzim MHETase yang teramati
pada fraksi whole cell, lisat sel (terlarut), dan debris sel (tidak terlarut). Aktivitas
degradasi MHET oleh MHETase putatif belum dapat teramati. Meskipun begitu,
enzim MHETase putatif tampak mampu mendegradasi BHET dengan aktivitas
yang rendah yang membuka kemungkinan baru untuk dilakukannya penelitain
mengenai peran MHETase sebagai pendegradasi BHET.
Kata kunci: PET, Ekspresi protein rekombinan, Escherichia coli BL21 (DE3), MHETase.

Actions (login required)

View Item