Kloning, Ekspresi, dan Purifikasi Protein Rekombinan Lakase dari Bakteri Arthrobacter psychrolactophilus

Putri, Laura Amelia (2024) Kloning, Ekspresi, dan Purifikasi Protein Rekombinan Lakase dari Bakteri Arthrobacter psychrolactophilus. Undergraduate thesis, Fakultas Sains dan Matematika Undip.

	Text 1. JUDUL.pdf Download (240kB)
	Text 2. HALAMAN PENGESAHAN.pdf Restricted to Repository staff only Download (316kB) \| Request a copy
	Text 5. ABSTRAK.pdf Download (326kB)
	Text 6. ABSTRACT.pdf Download (325kB)
	Text 7. DAFTAR ISI.pdf Download (343kB)
	Text 11. BAB I PENDAHULUAN.pdf Download (467kB)
	Text 16. DAFTAR PUSTAKA.pdf Download (366kB)

Abstract

Lakase (benzenediol: oxygen oxidoreductases; EC 1.10.3.2) adalah enzim yang
memiliki peran aplikasi pada bidang tekstil sebagai bioremediasi dengan
dekolorisasi pewarna tekstil yang sulit didegradasi dan bersifat toksik bagi
lingkungan. Lakase mampu beradaptasi pada suhu rendah karena diproduksi oleh
bakteri ekstremofil psikrofilik Arthrobacter psychrolactophilus. Arthrobacter
psychrolactophilus memproduksi lakase dalam jumlah sedikit, sehingga diperlukan
teknologi rekombinan untuk produksi lakase dalam jumlah yang lebih banyak dan
mempermudah pemurnian lakase yang didapat setelah proses kloning dan ekspresi
protein rekombinan. Kloning gen pengkode enzim lakase dengan ukuran 1.536 bp
dilakukan melalui sel inang Escherichia coli DH5-α pada vektor pET-28a(+)
menggunakan In-Fusion® HD Cloning Kit. Ekspresi protein rekombinan lakase
dilakukan untuk pelipatan (folding) membentuk protein fungsional pada
Escherichia coli BL21 Star (DE3) dengan induksi Isopropyl-β-Dthiogalactopyranoside (IPTG) pada suhu 14℃. Hasil ekspresi divisualisasikan
dengan metode SDS-PAGE yang menunjukkan pita protein rekombinan lakase
berukuran 54,547 kDa. Lakase diproduksi sebanyak 1 liter untuk pemurnian
melalui Immobilized Metal Affinity Chromatography (IMAC) dengan column histag 1 mL yang menghasilkan puncak elusi protein target pada grafik dari fraksi 8-
16. Enzim yang murni diindikasikan oleh munculnya single band setelah visualisasi
SDS-PAGE. Total protein lakase murni diukur menggunakan Bicinchoninic Acid
(BCA) Protein Assay dengan nilai 2,722 mg dari 1,940 mg sampel purified A
(fraksi 12-15) dan 0,782 mg sampel purified B (fraksi 11 dan 16).
Kata Kunci: Lakase, Arthrobacter psychrolactophilus, Kloning, Ekspresi,
Purifikasi

Item Type:	Thesis (Undergraduate)
Subjects:	Sciences and Mathemathic
Divisions:	Faculty of Science and Mathematics > Department of Biology
Depositing User:	Suhersi Rahmadhani
Date Deposited:	02 Dec 2025 08:02
Last Modified:	02 Dec 2025 08:02
URI:	https://eprints2.undip.ac.id/id/eprint/41740

Actions (login required)

View Item

Search for collections on Undip Repository