Handoyo, Leoni (2026) Ekspresi Gen dan Optimasi Produksi Xilanase GH Famili 11 dari Kitasatospora sp. pada Escherichia coli BL21 (DE3). Undergraduate thesis, Fakultas Sains dan Matematika Undip.

	Archive Leoni Handoyo.zip Restricted to Repository staff only Download (5MB) | Request a copy
	Text 1. Cover.pdf Download (135kB)
	Text 3. Prakata.pdf Download (168kB)
	Text 4. Abstrak.pdf Download (222kB)
	Text 5. Abstract.pdf Download (221kB)
	Text 6. Daftar Isi.pdf Download (201kB)
	Text 10. Pendahuluan.pdf Download (248kB)
	Text 15. Daftar Pustaka.pdf Download (353kB)

Abstract

Xilanase merupakan enzim yang mampu menghidrolisis xilan menjadi
xilooligosakarida (XOS) dan xilosa. Enzim ini memiliki banyak aplikasi di bidang
industri farmasi, makanan dan pakan, toko roti, kertas dan bubur kertas, tekstil,
hingga bio-refinery. Penggunaan enzim dalam industri dibutuhkan dalam jumlah
yang tinggi dan mampu bertahan dalam proses industri sehingga diperlukan
mikroba potensial yang mampu memproduksi xilanase. Penelitian sebelumnya
mengenai xilanase (GH-10 dan GH-11) dari strain Kitasatospora sp. ID06-480
yang diekspresikan pada Streptomyces lividans 1326 secara efisien menghidrolisis
xilan dan menghasilkan XOS. Escherichia coli BL21 (DE3) merupakan host cell
yang baik dalam ekspresi protein rekombinan karena kemampuanya dalam over
ekspresi protein. Penelitian mengenai ekspresi heterolog xilanase GH11 yang
berasal dari Kitasatospora sp. ID06-480 pada bakteri Escherichia coli BL21 (DE3)
perlu dilakukan untuk mengetahui ekspresi dan aktivitasnya. Tujuan dalam
penelitian ini untuk mengetahui ekspresi gen xilanase GH famili 11 dari
Kitasatospora sp. pada Escherichia coli BL21 (DE3). Selain itu, dilakukan analisis
mengenai media produksi yang optimum untuk meningkatkan aktivitas enzim
xilanase GH famili 11 rekombinan. Analisis terkait suhu, konsentrasi IPTG, dan
post induction time yang optimum secara simultan saat produksi dilakukan
menggunakan metode Response Surface Methodology-Box-Behnken Design (RSMBBD) untuk meningkatkan aktivitas enzim xilanase GH famili 11 rekombinan.
Transformasi plasmid dengan sisipan gen xilanase GH11 ke Escherichia coli BL21
(DE3) dilakukan, dilanjutkan dengan seleksi koloni terbaik dilihat dari visualisasi
ekspresi protein melalui SDS PAGE. Koloni terpilih digunakan untuk optimasi
media produksi (LB, TB, 2x YT, dan SC 100%) dan optimasi produksi dengan
RSM-BBD (suhu, konsentrasi IPTG, dan post induction time secara simultan)
dalam meningkatkan aktivitas enzim. Hasil penelitian menunjukkan xilanase GH
famili 11 dari Kitasatospora sp. berhasil diekspresikan pada Escherichia coli BL21
(DE3). Media TB menjadi media optimum dengan nilai aktivitas terbesar 27
Unit/mL pada kultur jam ke-12. Suhu, konsentrasi IPTG, dan post induction time
secara simultan yang optimum dalam meningkatkan aktivitas secara berurutan,
yaitu 26,4˚C, 0,5 mM, 12 jam dengan nilai aktivitas 84,4237 Unit/mL.
Kata kunci : Escherichia coli BL21 (DE3), Xilanase GH11, Ekspresi heterolog, Optimasi produksi,
RSM-BBD

(NO KETERSEDIAAN : 310/B.TEK/2026)

Actions (login required)

View Item