HANIN, ALFIYAH (2026) PENAPISAN, ISOLASI, DAN PEMURNIAN SENYAWA PENGHAMBAT ENZIM DENV NS2B-NS3 PROTEASE DARI MIKROBA LAUT SEBAGAI KANDIDAT OBAT ANTI-DENGUE (26dik206). Undergraduate thesis, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan.

Text ALFIYAH HANIN 26dik206.pdf Restricted to Repository staff only Download (2MB)

Abstract

Demam Berdarah Dengue (DBD) merupakan penyakit endemik di
Indonesia yang disebabkan oleh virus dengue (DENV), namun hingga saat ini
belum tersedia obat antivirus spesifik untuk menanganinya. Penelitian ini bertujuan
untuk mengembangkan sistem penapisan, mengidentifikasi ekstrak aktif, serta
mengisolasi dan memurnikan senyawa penghambat enzim NS2B-NS3 protease dari
mikrob laut sebagai kandidat obat anti-dengue. Metode yang dipakai adalah
eksperimental kuantitatif dengan mengembangkan sistem pengujian berdasarkan
fluoresens menggunakan substrat Boc-GRR-MCA dan enzim rekombinan DENV
2 NS2B-NS3 protease. Sebanyak 320 ekstrak mikroba laut ditapis dengan
menggunakan 384-well plate. Kehandalan dari sistem penapisan dievaluasi
berdasarkan nilai faktor Z’ dan rasio signal-to-background (S/B). Pemurnian
senyawa aktif dilakukan menggunakan kromatografi kolom silika dan kromatografi
cair kinerja tinggi (HPLC) preparatif. Hasil menunjukkan bahwa sistem penapisan
yang telah dikembangkan menunjukkan tingkat kehandalan yang tinggi dengan
nilai faktor Z’ dan rasio S/B sebesar masing-masing 0,55 dan 0,62. Proses penapisan
berhasil mengidentifikasi 1 ekstrak mikroba laut yang secara konsisten
menghambat aktivitas enzim, yaitu ekstrak yang dibuat dari kultur Streptomyces
coeruleofuscus SPR24-23. Dua senyawa aktif telah diisolasi dan dimurnikan dari
ekstrak aktif tersebut. Kedua senyawa aktif ini menghambat 50% aktivitas enzim
NS2B-NS3 protease pada konsentrasi (IC50) masing-masing sebesar 7,1 µg/mL dan
5,6 µg/mL. Uji sitotoksisitas dari kedua senyawa aktif ini terhadap sel Vero, MCF
7, dan BHK21 menunjukkan konsentrasi sitotoksisitas 50% (CC50) antara 7,5
µg/mL hingga 29,2 µg/mL. Penelitian ini merupakan laporan pertama mengenai
ekstrak mikroba laut asal Indonesia yang aktif menghambat aktivitas enzim NS2B
NS3 protease dari virus dengue secara langsung sehingga menegaskan potensi
sumber daya hayati laut Indonesia dalam penemuan obat anti-dengue baru.

Actions (login required)

View Item