Soeroso, Venty Muliana Sari and Juniarto, Achmad Zulfa and Faradz, Sultana MH (2014) ANALISIS SINTESIS TETES LEMAK PADA GEN DGA1, LRO1, ARE1 DAN ARE2 PADA PROSES AUTOFAGI DENGAN MODEL KHAMIR Saccharomyces cerevisiae. Masters thesis, Universitas Diponegoro.

	Text (COVER) Halaman Judul.pdf Download (242kB)
	Text (BAB 1) Bab 1.pdf Download (64kB)
	Text (BAB 2) Bab 2.pdf Restricted to Registered users only Download (682kB)
	Text (BAB 3) Bab 3.pdf Restricted to Registered users only Download (473kB)
	Text (BAB 4) Bab 4.pdf Restricted to Registered users only Download (467kB)
	Text (BAB 5) Bab 5.pdf Restricted to Registered users only Download (1MB)
	Text (BAB 6) Bab 6.pdf Restricted to Registered users only Download (514kB)
	Text (BAB 7) Bab 7.pdf Restricted to Registered users only Download (48kB)
	Text (Daftar Pustaka - Lampiran) Dapus + Lampiran.pdf Restricted to Registered users only Download (1MB)

Abstract

Latar Belakang: Tetes lemak merupakan organela sitoplasmik yang berfungsi sebagai cadangan lipid sel. Penelitian terkini menunjukkan tetes lemak juga berperan pada berbagai penyakit inflamasi dan infeksi. Patogen misalnya, memanfaatkan tetes lemak dan menggunakan sistem autofagi untuk perkembangbiakan dan pertahanan diri. Sebaliknya, sel mengaktifkan autofagi untuk eliminasi patogen. Penelitian sebelumnya menemukan bahwa sel khamir mutan RS4∆, yang terdelesi pada 4 gen dalam sintesis tetes lemak, DGA1, LRO1, ARE1 dan ARE2, tidak mampu mengaktifkan respon stres autofagi akibat paparan toksik asam lemak eksogen. Sehingga diduga ada hubungan antara sintesis tetes lemak dan autofagi.
Metode: Strain Saccharomyces cerevisiae wild-type Y10000 dan mutan RS4∆ dikultur dalam media starvation (tanpa nitrogen) untuk menginduksi autofagi, kemudian kemampuan autofagi sel dievaluasi dengan mikroskop, western blot (WB) dan tes
kuantitatif uji PHO8∆60. Pada observasi mikroskopik, sel ditransformasi dengan plasmid marker fluoresen pSU9-GFP dan pVph1-RFP. WB mendeteksi lepasnya ikatan protein Atg8-GFP oleh protease vakuolar saat autofagi. Uji PHO8∆60 mengukur kadar fosfatase alkalin yang merefleksikan intensitas autofagi. Analisis peran gen dilakukan dengan uji PHO8∆60 menggunakan mutan RS4∆, dga1∆,lro1∆ dan mutan ganda dga1∆,lro1∆.
Hasil: Sel mutan RS4∆ menunjukkan gambaran mikroskopik autofagi negatif. Dengan WB, protein GFP bebas tidak terdeteksi pada mutan RS4∆. Intensitas autofagi mutan RS4∆ sangat rendah mendekati 0 dan berbeda bermakna (p=0.000) dengan wild-type.
Mutan ganda dga1∆,lro1∆ memiliki intensitas autofagi yang rendah dan tidak berbeda bermakna dengan RS4∆ (p=0.183).
Kesimpulan: Sintesis tetes lemak terutama oleh fungsi gen DGA1 dan LRO1 untuk sintesis Triasilgliserol memiliki peranan penting dalam proses autofagi.
Kata Kunci: Tetes lemak, gen DGA1, LRO1, ARE1, ARE2, autofagi

Actions (login required)

View Item