Brajadenta, Gara and Faradz, Sultana MH and Winarni, Tri Indah (2014) ANALISIS EKSPRESI DAN IDENTIFIKASI LOKASI PROTEIN CHD7 (WILD TYPE) PADA SEL HELA DAN HEK 293. Masters thesis, Universitas Diponegoro.

	Text (Cover) Halaman Sampul.pdf Download (464kB)
	Text (Bab 1) Bab 1.pdf Download (99kB)
	Text (Bab 2) Bab 2.pdf Restricted to Registered users only Download (368kB)
	Text (Bab 3) Bab 3.pdf Restricted to Registered users only Download (27kB)
	Text (Bab 4) Bab 4.pdf Restricted to Registered users only Download (277kB)
	Text (Bab 5) Bab 5.pdf Restricted to Registered users only Download (585kB)
	Text (Bab 6) Bab 6.pdf Restricted to Registered users only Download (72kB)
	Text (Bab 7) Bab 7.pdf Restricted to Registered users only Download (8kB)
	Text (Daftar Pustaka) Daftar Pustaka.pdf Restricted to Registered users only Download (105kB)
	Text (Lampiran) Lampiran.pdf Restricted to Registered users only Download (100kB)

Abstract

Latar Belakang: Sindroma CHARGE merupakan salah satu penyakit genetik langka yang ditandai dengan beberapa kelainan congenital yang disebabkan oleh nonsense mutation secara de novo pada gen CHD7. Studi-studi sebelumnya menunjukkan bahwa protein CHD7 sebagian besar diekspresikan di nukleoplasma, namun beberapa studi terbaru membuktikan bahwa lokasi protein CHD7 (wild type) adalah di nukleoplasma dan nukleolus. Penentuan lokasi ekspresi protein CHD7 sangat penting untuk mempelajari fungsi dari protein tersebut dan selanjutnya dapat dikembangkan sebagai suatu tes fungsional pada protein CHD7, terutama pada gen CHD7 yang mengalami mutasi.
Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari ekspresi protein CHD7 dan mengkonfirmasi lokasi protein tersebut dengan menggunakan dua plasmid dan dua model seluler yang berbeda (sel HeLa dan HEK 293).
Metode: Tahapan awal penelitian ini adalah melakukan transfeksi dengan menggunakan dua plasmid: pCIneo-CHD7-HA dan pcDNA3-FLAG-CHD7. Untuk tujuan tersebut, dilakukan transfeksi kedalam dua model seluler: sel karsinoma serviks manusia (HeLa) dan sel embrionik ginjal manusia (HEK 293). Metode western blot digunakan untuk mempelajari ekspresi protein CHD7 dan lokasi protein CHD7 diidentifikasi dengan menggunakan teknik Immunofluorescence.
Hasil: Ekspresi protein CHD7-HA (wild type) dan FLAG-CHD7 (wild type) ditemukan pada kedua model seluler (sel HeLa dan HEK 293). Penelitian ini menyimpulkan bahwa lokasi protein CHD7 adalah di nukleoplasma dan bukan di nukleolus.
Kesimpulan: Ekspresi protein CHD7 (wild type) dapat dibuktikan pada kedua model seluler (sel HeLa dan HEK 293), akan tetapi lokasi protein CHD7 tersebut hanya dapat ditemukan di nukleoplasma sebagai regulator transkripsi.

Kata kunci: Sindrom CHARGE, protein CHD7, western blot, imunofluoresensi

Actions (login required)

View Item